Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 3410
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Biologia e manejo de doenças e pragas de plantas |
| Setor | Departamento de Fitopatologia |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Athus Diego Azevedo Silva |
| Orientador | OLINTO LIPARINI PEREIRA |
| Outros membros | Danilo Batista Pinho |
| Título | Filogenia molecular de fungos da ordem Meliolales (míldios negros) |
| Resumo | A ordem Meliolales inclui mais de 2500 espécies distribuídas em 11 gêneros de parasitas especializados de plantas que causam doenças denominadas de míldios negros. Os míldios negros infectam espécies cultivadas de grandes culturas, fruteiras, espécies florestais, plantas ornamentais, plantas invasoras e plantas silvestres. Apesar da existência de diversos métodos de extração de DNA fúngico e das tentativas de vários micologistas, somente três sequências de Meliolales estão disponíveis em bancos públicos. Atualmente, é necessário comprovar o relacionamento dos Meliolales com as demais ordens da classe Sordariomycetes. Objetivou-se neste trabalho: i) obter o relacionamento filogenético da ordem Meliolales na classe Sordariomycetes; ii) verificar se esta ordem é distinta das demais ordens; iii) verificar e indicar os melhores genes para inferir relacionamentos filogenéticos entre espécies causadoras de míldios negros. Os conjuntos de primers ITS1/ITS4, ITS4/ITS5, LR0R/LR5, NS1/NS4 foram utilizados para amplificar as regiões ITS, 18S e 28S do rDNA. Regiões parciais do fator de elongação, β-tubulina, MCM7, subunidade 1 e 2 da RNA polimerase II também foram testadas com os conjuntos de primers 728F/986R, EF1/EF2, EF1-F/EF2-R, T1/T2, T1/2B, 709F/1348R, AF/CR, 5F2/7CR e 7CF/11AR. A amplificação foi realizada usando um volume final de 25 µL, contendo 12,5 µL de Dream Taq PCR Master Mix, 1 µL de cada primer, 1 µL de DMSO, 5 µL de BSA, 2 µL de DNA genômico e 2,5 µL de água. A purificação e sequenciamento dos produtos de PCR foram realizados pela MACROGEN. Com exceção da região gênica MCM7, todos os demais primers utilizados foram eficientes para amplificar a região de interesse. No entanto, a maior porcentagem de amplificação ocorreu para as regiões 18S e 28S do rDNA. Seqüências das regiões 18S e 28S do rDNA e RNA polimerase 2 (RPB2) foram disponibilizadas no banco de dados (GenBank). Entre as sequências das diferentes regiões gênicas testadas, a região 28S do rDNA possui a maior taxa de sucesso de amplificação e um polimorfismo de nucleotídeos suficiente para a discriminação de espécies de míldios negros. Ao realizar a análise concatenada das regiões 18S, 28S e RNA polimerase, foi possível distinguir os Meliolales das demais ordens da classe Sordariomycetes. Além disso, observa-se que a ordem pertence a subclasse Sordariomycetidae. Os resultados desse trabalho comprovam que os míldios negros pertencem a subclasse Sordariomycetidae e representam uma ordem distinta entre os Sordariomycetes. Os resultados de análises filogenéticas também indicam que esse grupo fúngico é polifilético. |
| Palavras-chave | Fungos tropicais, Míldios negros, Sordariomycetes |
| Forma de apresentação..... | Oral |