Resumo |
A cana-de-açúcar é uma monocotiledônea pertencente à família poaceae. É uma cultura de grande importância no país, pois o Brasil ocupa a primeira posição na produção de etanol e açúcar. A cultura da cana-de-açúcar é estudada por vários programas de melhoramento genético para a obtenção de cultivares com características agronômicas desejáveis. A transformação genética é um método eficiente para a obtenção dessas características, porém é necessário o desenvolvimento de um protocolo eficiente para a produção de embriões somáticos viáveis. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial de regeneração de embriões somáticos, a produção de calos embriogênicos e a proliferação de brotações via organogênese de cana-de-açúcar utilizando auxinas, citocininas e fenil-ureia na obtenção de material para transformação genética da variedade RB 867515. Ápices caulinares (7,0 x 0,8cm) de cana-de-açúcar foram desinfestados e inoculados em frascos contendo 30 ml de meio de MURASHIGE E SKOOG (MS), suplementado com 3% de sacarose, 100 mg.L-1 de mio-inositol, 100 mg.L-1 anti-oxidantes (PVP, ácido cítrico e ácido ascórbico), suplementados com 0,5 mg.L-1 BAP e solidificado com Agar (Merck) 7,0g.L-1 . Após o estabelecimento as plântulas in vitro foram utilizadas como explantes. Estas foram transferidas para meios de regeneração contendo diferentes combinações de BAP (0,5 e 2 mg.L-1), ANA (0,5 e 2 mg.L-1), ABA (0,5 e 2 mg.L-1), Giberelina (0,5 e 2 mg.L-1) e TDZ (0,5 e 2 mg.L-1) sendo os tratamentos combinados com a 1 mg. L-1 2,4 D ou com a ausência do mesmo. Após 30 dias foi avaliada a porcentagem de calos embriogênicos e não embriogênicos e o número de brotações por explante. Foi possível observar calos embriogênicos em 65% dos explantes no tratamento com 0,5 mg. L-1 TDZ combinados com 1 mg. L-1 2,4 D. Nos tratamentos com ABA (0,5 e 2 mg.L-1) e 2 mg.L-1 TDZ combinados com 2,4 D foi observado que 100% dos explantes possuíam calos não embriogênicos. Para a variável número de brotações o controle apresentou o maior numero de brotações por explante. Diante dos resultados pode-se concluir que o tratamento com 0,5 mg. L-1 TDZ combinados com 1 mg. L-1 2,4 D foi o que demonstrou-se mais adequado para a produção de calos embriogênicos, sendo que a presença de 2,4 D é de grande importância para a produção de calos embriogênicos. O TDZ não é recomendado para a produção de calos embriogênicos. Grande número de brotações pode ser obtido com o meio MS sem a adição de reguladores de crescimento. O método utilizado neste estudo de embriogênese somática in vitro da variedade RB867515 de cana-de-açúcar apresenta potencial de aplicação na transformação via Agrobacterium e biobalística. |