Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 3098
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Fisiologia vegetal |
| Setor | Departamento de Biologia Vegetal |
| Bolsa | FAPEMIG |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | FAPEMIG |
| Primeiro autor | Jéssica Maciel Terra |
| Orientador | ADRIANO NUNES NESI |
| Outros membros | Danielle Santos Brito |
| Título | Clonagem e caracterização funcional do transportador mitocondrial succinato/fumarato (SFC1) em Arabidopsis thaliana |
| Resumo | Com o advento da era genômica e pós-genômica alguns transportadores mitocondriais com domínios similares aos da família de transportadores mitocondriais (MCF) têm sido bioquimicamente caracterizados. Contudo, o papel fisiológico da maioria desses carreadores ainda não foi esclarecido. Dentre os transportadores identificados em Arabidopsis thaliana que, ainda não foi caracterizado quanto à função, encontra-se o transportador denominado de AtmSFC1 (mitochondrial succinate-fumarate carrier 1), homólogo ao transportador ACR1 de Saccharomyces cerevisae. A expressão do gene que codifica o SFC1 ocorre principalmente em folhas fonte e dreno, raízes, caule, bem como flores abertas e fechadas. Nesse sentido, é fundamental a verificação e o entendimento do papel fisiológico dessa proteína em plantas. Assim, este trabalho teve por objetivos: (i) gerar plantas transgênicas de A. thaliana silenciando o gene SFC1 via antisenso sob o controle do promotor 35S; (ii) identificar as linhas transgênicas com reduzida expressão de SFC1; e (iii) caracterizar fisiológica e metabolicamente as linhas selecionadas. Das plantas transformadas obtiveram-se sementes viáveis, as quais foram semeadas em meio MS contendo o agente de seleção higromicina (Hyg). As plantas que apresentaram resistência à higromicina, foram transplantadas para vasos e crescidas em câmara de crescimento. Após quatro semanas de cultivo, folhas completamente expandidas foram coletadas para confirmação da inserção da construção e análise da expressão de SFC1 via técnicas de PCR. Quatorze linhas mostraram-se resistentes a higromicina, apresentando plantas com 2-3 pares de folhas e com uma raiz de crescimento normal. Das quatorze plantas obtidas, confirmou-se a inserção da construção em apenas oito. Estas foram, então submetidas à análise de expressão pela técnica de PCR semi-quantitativo. Apenas, cinco plantas apresentaram baixa expressão do gene SFC1. Estas plantas com baixa expressão serão utilizadas para uma caracterização detalhada em nível molecular e metabólico em condições ótimas ao crescimento de Arabidopsis, bem como condições de estresse abiótico. |
| Palavras-chave | Mitocôndria, transportador mitocondrial, SFC1 |
| Forma de apresentação..... | Painel |