Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 3089
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Pós-graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Nanociência/nanotecnologia |
| Setor | Departamento de Biologia Geral |
| Bolsa | CAPES |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | FAPEMIG |
| Primeiro autor | Luan Prados Calegari |
| Orientador | SERGIO OLIVEIRA DE PAULA |
| Título | Utilizando nanotubos de carbono para transfecção de um candidato vacinal tetravalente contra o vírus da dengue |
| Resumo | As infecções causadas pelo vírus da dengue constituem a principal arbovirose em nível mundial e são de grande importância para o nosso país, sendo o vírus representado por quatro sorotipos diferentes DENV-1, DENV-2, DENV-3 e DENV-4. Atualmente, o controle da doença se baseia na tentativa de eliminar os mosquitos do gênero Aedes que são os transmissores do vírus. Devido ao fato que anticorpos produzidos em uma infecção primária podem agravar o quadro da doença em uma infecção secundária por um sorotipo heterólogo, possíveis vacinas contra a dengue devem ser tetravalentes para evitar que ocorra tal fenômeno. Em nosso laboratório foi desenvolvido um candidato vacinal tetravalente, o qual foi construído por meio de sucessivas subclonagens dos genes que codificam para o domínio III da proteína E de cada um dos sorotipos do vírus no vetor de expressão pVAX1. Para tentar melhorar a eficácia desse candidato vacinal, nesse trabalho nós utilizamos nanotubos de carbono de paredes múltiplas (MWCNTs, na sigla em inglês) como um nanovetor para a distribuição do plasmídeo em cultura celular. Para esse propósito, foi feita a conjugação do vetor de expressão plasmidial com os MWCNTs usando um banho ultrassônico e, em seguida, essa solução de plasmídeo + MWCNTs foi utilizada para transfectar células Vero, por meio de sua adição ao meio de cultura. Comparações foram feitas entre as células transfectadas com o plasmídeo misturado com MWCNTs e o plasmídeo puro, para o qual foi utilizado o método de transfecção por fosfato-cálcio. As análises da conjugação entre o plasmídeo e os MWCNTs foram feitas por espectroscopia Raman, microscopia eletrônica de transmissão e eletroforese em gel de agarose. A expressão proteica dos genes inseridos no vetor de expressão plasmidial foi analisada por SDS-PAGE e imunofluorescência. Os resultados mostraram que o plasmídeo e os MWCNTs conjugaram entre si, e as análises de expressão proteica mostraram diferenças entre o plasmídeo transfectado puro e quando conjugado com MWCNTs. Para os próximos passos, nós vamos testar esse candidato vacinal em camundongos e avaliar a resposta imune do mesmo quando este é administrado com ou sem os MWCNTs. |
| Palavras-chave | nanotubos, vacina, dengue |
| Forma de apresentação..... | Painel |