Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 2982
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Veterinária |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG, Outros |
| Primeiro autor | Lorena Keller de Jesus Pereira |
| Orientador | Maria Cristina Baracat-Pereira |
| Outros membros | ABELARDO SILVA JUNIOR, Janine Cerqueira de Paiva, MARCIA ROGERIA DE ALMEIDA LAMEGO, Marcos Jorge Magalhães Júnior |
| Título | Análise proteômica diferencial de células MDBK infectadas com o herpesvírus bovino 1 |
| Resumo | O herpesvírus bovino 1 (BoHV-1) pertence à família Herpesviridae, sub-família Alphaherpesvirinae. O BoHV-1, disseminado na bovinocultura, acarreta prejuízos econômicos aos países criadores de gado. No ciclo de infecção do herpesvírus, são expressas mais de 80 proteínas. Seus genes estão didaticamente divididos em Immediate Early Genes (IEG), Early Genes (EG) e Late Genes (LG). Os IEG são expressos 2 a 4 horas pós-infecção (hpi) e os EG são expressos 5 a 7 hpi. De modo geral, as proteínas do BoHV-1 têm como alvo na célula hospedeira vias metabólicas essenciais para o sucesso da infecção produtiva e latente. O vírus ajusta o metabolismo dos ácidos nucleicos do hospedeiro à replicação, transcrição e tradução do genoma viral. Causam perturbações nos mecanismo de silenciamento gênico, nos bloqueios epigenéticos, na sinalização cálcio-dependente, nos mecanismos de modificação pós traducional, na produção de NF-κB (factor nuclear kappa B) e na apoptose, e os PAMPs (pathogen-associated molecular patterns) ativam a imunidade inata e celular. A proteômica, o estudo do conjunto de proteínas e suas isoformas expressas em um momento biológico, pode fornecer uma descrição mais extensa e detalhada da infecção do BoHV-1 pelo perfil proteico diferencial. Este trabalho tem como objetivo a avaliação proteômica abrangendo a dinâmica do estado de infecção in vitro, a fim de identificar vias metabólicas envolvidas ou afetadas pelo BoHV-1. Estas proteínas contribuirão na identificação de biomarcadores ou alvos farmacológicos para o controle do BoHV-1. Para realização dos ensaios in vitro, foram utilizadas células da linhagem de rim de bovino Madin Darby Bovine Kidney (MDBK) cultivadas em meio essencial minimo (MEM) suplementado com 5% de soro fetal bovino. As monocamadas de células semi-confluentes foram infectadas com o BoHV-1, purificado em gradiente de sacarose. Extratos foram preparados e as dosagens de proteínas foram realizadas pelo método de Bradford. A isoeletrofocalização foi realizada em equipamento IPGphor II (GE Healthcare), utilizando-se inicialmente tiras IPG de faixas de pH 3-10L de 7 cm, com 120 µg de proteínas, e a segunda dimensão foi em SDS-PAGE 12,5%T. O géis estão sendo analisados e as proteínas diferencialmente expressas serão tripsinizadas e identificadas por MS1 e MS2, e poderão contribuir para identificar marcadores moleculares, alvos farmacológicos e/ou contribuir para o entendimento biológico do ciclo viral. |
| Palavras-chave | herpesvírus bovino 1, ensaios in vitro, análise proteômica diferencial |
| Forma de apresentação..... | Painel |