Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 2948
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Pós-graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Bioquímica e Biologia Molecular |
| Bolsa | CAPES |
| Conclusão de bolsa | Não |
| Apoio financeiro | Outros |
| Primeiro autor | Cynthia Mantovani |
| Orientador | CLAUDIO LISIAS MAFRA DE SIQUEIRA |
| Outros membros | Cláudia Portes Santos Silva, Edvaldo Barros, HUMBERTO JOSUE DE OLIVEIRA RAMOS, Michele Stéfany Alves dos Santos |
| Título | Caracterização do perfil proteico de larvas de Hysterothylacium sp. a partir de Trichiurus lepturus da Costa do Rio de Janeiro, Brasil |
| Resumo | Introdução: O parasitismo em ambientes aquáticos é um fenômeno natural. Com o aumento do cultivo e comercialização de peixes e o crescimento do hábito de se ingerir peixe cru ou mal cozido ocorre, concomitantemente, o aumento da importância de estudos relacionados com estes parasitos. Em 1995 a OMS estimou a existência de 39 milhões de pessoas infectadas por parasitos transmitidos pela ingestão de peixes crus ou mal cozidos. Anisaquíase é o nome dado para a doença causada por vermes da família Anisakidae, onde o homem ocorre como hospedeiro acidental no ciclo do parasito. A anisaquíase é uma doença subestimada e negligenciada devido a falta de conhecimento a respeito, pouco recurso para diagnósticos, facilmente confundida com outras doenças gastrointestinais e há falta de caracterização morfológica para identificação de larvas à nível de espécie. Objetivo: visando maiores esclarecimentos a repeito do anisakídeos, foi sujerida a realização da caracterização proteica de larvas do nematódeo Hysterothylacium sp. Material e métodos: no estudo foram utilizadas 50 larvas de Hysterothylacium sp. obtidas a partir de necropsia de peixes da espécie Trichiurus lepturus. Para obtenção das proteínas, o pool de larvas foi colocado em 50µL da solução de SDS-PAGE (0.125M Tris-HCl, 4% SDS, 20% v/v Glicerol, 0.2M DTT, 0.02% Azul de bromofenol), sonicado, centrifugado e o sobrenadante contendo as proteínas foi recuperado. A eletroforese monodimensional foi realizada por SDS-PAGE em gel de 12,5% e corado com Coomassie brilhante. Um total de 40 bandas foram excisadas e tripsinizadas. Posteriormente os peptídeos trípticos foram submetidos à análise por MALDI TOF/TOF e LC-MS, os dados de MS1 e MS2 foram confrontados no banco de dados NCBI e banco de EST de nematódeos pelo algoritmo MASCOT. Os resultados de identificação do MASCOT foram validados pelo software Scaffold. Para uma melhor abrangência da cobertura dos peptídeos em relação às proteínas, os spectros obtidos por LC-MS foram analisados pelo software pep-novo. Resultados: foram detectadas 88 proteínas das quais destacam-se proteínas relacionadas às vias metabólicas, proteínas ribossomais, proteínas estruturais e proteína de alvo vacinal. Conclusão: A análise por LC-MS mostrou-se ser uma ferramenta poderosa para a identificação de amostras biológicas, a partir de pequenas quantidades de proteínas extraídas (Hysterothylacium sp.), nos permitindo uma caracterização biológica funcional e seu potencial em termos farmacológicos e biotecnológicos. |
| Palavras-chave | Hysterothylacium, Helminto, proteômica |
| Forma de apresentação..... | Painel |