Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 2420
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Biológicas e da Saúde |
| Área temática | Farmacologia e bioquímica |
| Setor | Departamento de Biologia Geral |
| Bolsa | PIBIC/CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CAPES, CNPq, FAPEMIG |
| Primeiro autor | Gracielle Rodrigues Pereira |
| Orientador | LEANDRO LICURSI DE OLIVEIRA |
| Outros membros | Christiane Eliza Motta Duarte, Isabela Berbert da Guia |
| Título | Purificação e caracterização parcial de uma lectina purificada de Hovenia dulcis |
| Resumo | Lectinas são proteínas que se ligam reversível e especificamente a carboidratos. Elas estão largamente distribuídas na natureza, sendo que muitas delas já foram isoladas de plantas, bactérias e animais, representando um grupo diversificado de proteínas. Lectinas purificadas de plantas têm exibido atividade antitumoral e anticarcinogênica. Neste trabalho objetivou-se purificar e caracterizar parcialmente uma lectina dos frutos de Hovenia dulcis, conhecida popularmente como uva-do-Japão. Para que a lectina fosse purificada, preparou-se o extrato bruto, batendo-se os frutos em liquidificador em tampão PBS e deixando-o em geladeira por aproximadamente 16 horas. Então o extrato obtido foi filtrado e purificado em coluna de afinidade de fetuína. O eluato obtido foi submetido ao teste de hemaglutinação com sangue de diferentes espécies, para confirmar a presença de lectina. Foi observada a atividade em sangue de camundongo, rato e cabra. Procedeu-se então a caracterização parcial da lectina. Para tanto ela foi submetida à cromatografia de filtração em gel, foi avaliado o efeito do pH e da temperatura sobre a atividade hemaglutinante, inibição da atividade por açúcares, e avaliação da dependência de cátions bivalentes. A cromatografia de afinidade proporcionou uma purificação de aproximadamente 40 vezes. Não foi notada nenhuma atividade hemaglutinante com sangue humano (tipos A, B e O). A lectina teve seu peso molecular estimado em 18 kDa pela cromatografia de filtração em gel, apresentou estabilidade nos valores de pH de 5,0 a 11,0 e foi termoestável por uma hora nas temperaturas de 0 a 100°C. Os açúcares testados no ensaio de inibição foram melibiose, D-galactose, D-manose, L-fucose, D-glicose, N-acetil-D-glicosamina, lactose e arabinose. Nenhum deles foi capaz de inibir a atividade da lectina. A mesma possui dependência de cátions bivalentes para sua atividade. Foram testados os cátions Ca2+, Mg2+ e Mn2+, sendo o Mg2+ o cátion que mais influenciou na atividade hemaglutinante, seguido por Ca2+ e posteriormente o Mn2+, de maneira que todos auxiliaram na atividade da lectina. A partir da caracterização a lectina purificada, a mesma poderá ser utilizada em estudos que visem avaliar sua possível atividade biológica, por exemplo, contra células tumorais. |
| Palavras-chave | Lectina, purificação, caracterização |
| Forma de apresentação..... | Painel |