Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social

20 a 25 de outubro de 2014

Trabalho 2056

ISSN 2237-9045
Instituição Universidade Federal de Viçosa
Nível Graduação
Modalidade Pesquisa
Área de conhecimento Ciências Biológicas e da Saúde
Área temática Biotecnologia
Setor Departamento de Biologia Geral
Bolsa PROBIC/FAPEMIG
Conclusão de bolsa Sim
Apoio financeiro CNPq, FAPEMIG
Primeiro autor Cynthia Aparecida Valiati Barreto
Orientador LEANDRO LICURSI DE OLIVEIRA
Outros membros Gracielle Rodrigues Pereira, Karla Veloso Gonçalves Ribeiro, SERGIO OLIVEIRA DE PAULA
Título Avaliação do efeito de bacteriófagos líticos na prevenção e erradicação de biofilmes formados por E. coli
Resumo Os biofilmes formados por Escherichia coli constituem um mecanismo de resistência aos antibióticos. Considerando sua importância, a prevenção da formação ou remoção do biofilme de forma eficiente consiste um importante alvo terapêutico. O bacteriófago Ecofago 017, isolado de amostras da rede de esgoto de Vicosa-MG, pelo LIVM, é um parasita bacteriano geneticamente e estruturalmente simples e com ciclo de vida curto. Por ele infectar bactérias seletivamente e provocar sua lise, ele pode prover uma técnica natural, altamente específica e viável para controlar vários microrganismos envolvidos na formação de biofilmes. O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito do bacteriófago Ecofago 017 na prevenção e erradicação de biofilmes de E. coli. Os experimentos foram realizados utilizando cultura bacteriana com aproximadamente 108 UFC/mL. Para avaliar o tempo de formação de biofilme, 20 μL de cultura bacteriana foram adicionados a 180 μL de LB. As placas foram incubadas em atmosfera úmida em estufa a 37°C por 24, 48 e 72 h e a absorbância a 600nm foi determinada. Imediatamente a cultura bacteriana foi removida e os poços foram lavados com PBS 3 vezes. Após a última lavagem as células aderidas foram coradas com cristal violeta (CV) e foi medida a absorbância a 590 nm. Para a avaliação do efeito do bacteriófago na prevenção da formação do biofilme, quantidades iguais a 20 μL de cultura bacteriana e de fago em diferentes diluições foram adicionadas a 160 μL de LB. A placa foi incubada em estufa a 37°C por 24 h e a absorbância a 600 nm foi determinada e os poços corados com CV para quantificação do biofilme. Na avaliação do efeito do bacteriófago na degradação do biofilme, 20 μL de cultura bacteriana foram adicionados a 180 μL de LB. As placas foram incubadas em atmosfera úmida em estufa a 37°C por 24h. Após a formação do biofilme, a cultura bacteriana foi descartada e os poços foram lavados e, imediatamente acrescidos de 20 μL de fago em diferentes diluições e 180 μL de LB. As placas foram incubadas em atmosfera úmida em estufa a 37°C por 24 h. Após incubação, a absorbância a 600 nm foi determinada e os poços foram corados com CV. Os resultados sugerem que o Ecofago 017 pode ser usado tanto para reduzir a fixação bacteriana quanto para lizar células associadas a biofilmes de E. coli, gerando potenciais aplicabilidades biotecnológicas para este fago.
Palavras-chave Biotecnologia, Biofilme, Bacteriófago
Forma de apresentação..... Painel
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