Resumo |
Amblyomma cajennense é um dos principais carrapatos de importância médica e zoonótica. No Brasil, esta espécie é o principal vetor da Rickettsia rickettsii, agente causador da forma mais letal da Febre Maculosa Brasileira. Um evento chave para a manutenção e amplificação de riquétsias patogênicas no ambiente é a transmissão transovariana de riquétsias, onde, durante a ovogênese, ocorre a transmissão da bactéria do carrapato infectado para os ovos em formação. No entanto, eventos de expressão gênica que dirigem este processo ainda são desconhecidos, limitando em odesenvolvimento de estratégias de controle populacional deste importante artrópode hematófago. Nesse sentido, as novas plataformas de sequenciamento de nova geração têm se destacado como ferramentas fundamentais para o estudo em genômica funcional (RNASeq) de espécies cujo de genoma estrutural ainda não foi ainda sequenciado, como é o caso do A. cajennense. Dessa forma, este estudo, através da obtenção de transcriptomas de ovários de fêmeas adultas do A. cajennense, analisou a expressão gênica global nestes órgãos em condições de não-infecção e infecção com Rickettsia amblyommii, usando a tecnologia Illumina HiSeq 2000. Um total de 104.682.296 reads foi gerado para os dois transcriptomas obtidos, sendo identificados 34.084 unigenes e 33.687 unigenes, respectivamente, para os transcriptomas de ovários infectados (OI) e não infectados (ONI), intestinos infectados e intestinos não infectados com Rickettsia amblyommii. A anotação funcional dessas sequencias foi realizada contra os bancos de sequencias biológicas, sendo identificados 9.864 genes envolvidos em 199 diferentes vias metabólicas. Destes, 1.567 sofreram expressão diferencial significativa, comparando-se o transcriptoma OI contra o transcriptoma ONI. Dentre as vias significativamente alteradas em resposta à infecção pela R. amblyommii, destacaram-se aquelas relacionadas ao metabolismo de hormônios esteroidais, metabolismo central, bem como genes relacionados ao citoesqueleto, incluindo um modulador da extensão dos filamentos de actina, além da drástica redução de transcritos de receptores responsáveis pela ativação da resposta celular contra patógenos intracelulares. Estes resultados reforçam a hipótese de que riquétsias do grupo das Febres Maculosas possivelmente modulam a maquinaria de expressão gênica dos ovários, de maneira a facilitar os eventos de transmissão transovariana. Verificou-se nos intestinos infectados um drástico aumento de transcritos codificadores da via glicolítica, do Ciclo de Krebs e da Cadeira Transportadora de Elétrons, exceto para aqueles codificadores da Citocromo c oxidase, umas das responsáveis pela produção de espécies reativas de oxigênio, que é uma das respostas de defesa à patógenos intracelulares. |