Resumo |
Estudar o DNA em interação com substâncias é de grande importância, pois por essa análise conseguimos entender e avaliar o que ocorre com ele quando submetido a condições que não são as naturais no meio intracelular (como interagindo com fármacos ou qualquer outra substância). Passamos a entender a forma como as propriedades mecânicas da molécula de DNA sofrem modificações em seu comprimento de contorno (tamanho linear da molécula) e em seu comprimento de persistência (medida da rigidez da molécula), e para esse estudo utilizamos o método de pinçamento óptico. Para a verificação dos resultados obtidos com a pinça óptica utilizamos a técnica de espalhamento de luz. O DNA é preparado para que fique em condições parecidas com o meio intracelular. A pinça óptica consiste basicamente em um método de micromanipulação. Ela é formada por um microscópio e um laser. A objetiva do microscópio é responsável por focalizar o feixe de luz, gerando assim um poço de potencial, que consegue aprisionar microesferas. Com a analise do estiramento da molécula de DNA, em um gráfico de força por extensão, obtemos seu comprimento de contorno e de persistência. Nesse trabalho estudamos como as propriedades mecânicas do DNA são alteradas quando ele interage com o fármaco 3,3’-Diaminobenzidina (DAB). Através do experimento de pinçamento óptico pudemos observar que a substância Diaminobenzidina interagiu com o DNA e essa interação ocorreu de forma que suas moléculas intercalam entre os pares de base do DNA. Observamos isso devido ao fato de que, após a interação, o DNA sofreu aumento em seu comprimento de contorno e um aumento seguido de uma queda abrupta no comprimento de persistência. Essas são as características gerais de uma substância que interage com o DNA por intercalação. Com o experimento do espalhamento de luz observamos que o raio hidrodinâmico do DNA aumenta, em concordância qualitativa com os resultados obtidos na pinça. Para tanto, determinamos o raio de giro dos complexos DNA-DAB através dos comprimentos de persistência e contorno, e comparamos o comportamento deste parâmetro em função da concentração de DAB com o comportamento do raio hidrodinâmico. |