Ciência e Tecnologia: bases para o Desenvolvimento Social
20 a 25 de outubro de 2014
Trabalho 1885
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Biotecnologia |
| Setor | Departamento de Zootecnia |
| Bolsa | FUNARBIC/FUNARBE |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | FAPEMIG |
| Primeiro autor | Bruna Leite Sufiate |
| Orientador | ALYSSON SARAIVA |
| Outros membros | SIMONE ELIZA FACIONI GUIMARAES |
| Título | Expressão gênica em células da granulosa, corpos lúteos e oócitos em marrãs de raças com diferentes taxas de ovulação. |
| Resumo | As características relacionadas à reprodução têm sido um dos principais alvos dos programas de melhoramento genético, com destaque para o tamanho da leitegada, que tem como um de seus determinantes o número de oócitos liberados por estro. Este trabalho teve como objetivo avaliar a expressão de genes candidatos (GDF9, BCL2, BAX, BMP15, BMP6, FASL, TGFBR2, CASP8 e CASP3) relacionados ao desenvolvimento folicular durante o ciclo estral de fêmeas suínas de uma linhagem comercial de alta prolificidade (n=24) e da raça Piau, naturalizada brasileira, de baixa prolificidade (n=21). As fêmeas foram abatidas para coleta dos ovários aos dias 0, 4, 10 e 18 do ciclo estral e os folículos ovarianos visíveis foram classificados pelo diâmetro. Complexos cumulus-oócito foram classificados como normais ou atrésicos. Foram isolados os oócitos, as células da granulosa e os corpos lúteos, sendo congelados em nitrogênio líquido até a extração de RNA, que foi feita usando-se RNeasy Micro Kit (Quiagen, Valencia, CA). As amostras foram quantificadas utilizando-se o espectrofotômetro NanoVue Plus (GE Healthcare Bio-Sciences, Psicataway, NJ, EUA) e a integridade do RNA foi verificada usando-se Agilent 2100 Bioanalyser Nano Kit (Agilent Technologies, EUA). Em seguida, procedeu-se a síntese de cDNA utilizando-se ProtoScript M-MuLV First Strand cDNA Synthesis Kit (New England Biolabs, Ipswich, MA, EUA) com 5 μg de olido(dT). O PCR quantitativo em tempo real foi feito usando-se SyBr Green GoTaq qPCR Master Mix (Promega, Madison, WI, EUA). Os primers utilizados foram desenhados com o software PrimerQuest (Integrated DNA Technologies, Coralville, IA, EUA) a partir de sequências disponíveis no GenBank. O gene GAPDH foi usado como gene de referência. As diferenças na expressão de genes foram estimadas pelo método 2-ΔCt de Livak and Schmittgen (2001). As comparações foram feitas usando o SAS GLM PROCEDURE. Baixas taxas de ovulação nas marrãs Piau foram associadas a um padrão diferente de desenvolvimento folicular, com menor número de folículos pequenos no dia 18 e menor número de folículos grandes nos dias 0 e 18 (P ≤ 0,05) e maior proporção de folículos atrésicos nos dias 0 e 18 (P ≤ 0,05). Comparadas às fêmeas da linhagem comercial, as fêmeas menos prolíficas Piau apresentaram maior expressão de genes apoptóticos durante a luteólise (CASP3 e FASL; P ≤ 0,05), diminuição da expressão de mRNA de TGFBR2 e de BAX em corpos lúteos (P ≤ 0,05), maior expressão de genes apoptóticos (FAS, BCL2 e CASP8; P ≤ 0,05) em células da granulosa e maior abundância (P ≤ 0,05) de genes controlando fatores oócito-secretados (GDF9, BMP15 e BMP6). Os perfis de expressão gênica observados condizem com as diferenças de dinâmica folicular entre as duas raças. No entanto, as diferenças observadas na abundância de mRNA não significam necessariamente diferenças na produção de proteínas, tornando necessários estudos futuros de proteômica. |
| Palavras-chave | prolificidade, expressão gênica, piau |
| Forma de apresentação..... | Painel |