Bioeconomia: Diversidade e Riqueza para o Desenvolvimento Sustentável
21 a 25 de outubro de 2019
Trabalho 12902
| ISSN | 2237-9045 |
|---|---|
| Instituição | Universidade Federal de Viçosa |
| Nível | Graduação |
| Modalidade | Pesquisa |
| Área de conhecimento | Ciências Agrárias |
| Área temática | Ciências Biológicas |
| Setor | Instituto de Ciências Agrárias |
| Bolsa | CNPq |
| Conclusão de bolsa | Sim |
| Apoio financeiro | CNPq |
| Primeiro autor | Gabriel Angelo Saraiva Raimundo |
| Orientador | JOAO PAULO BATISTA MACHADO |
| Outros membros | Christiane Eliza Motta Duarte, ELIZABETH PACHECO BATISTA FONTES, Iara Pinheiro Calil, Ruan Maloni Teixeira |
| Título | Efeito da proteína AtWWP1 no particionamento núcleo-citoplasma da proteína NIG sob estímulo do ácido salicílico no processo de infecção por begomovírus |
| Resumo | Os patógenos do gênero Begomovirus (família Geminiviridae) são transmitidos pela mosca branca (Bemisia tabaci), e têm grande importância agronômica, principalmente nas regiões tropicais e subtropicais, causando prejuízos a atividades como a feijicultura, tomaticultura e sojicultura. Dentre as proteínas produzidas a partir do seu genoma, que pode ser mono ou bissegmentado, um componente é crucial para a infecção viral, a proteína NSP (nuclear shuttle protein), que facilita o transporte intracelular do DNA viral do núcleo para o citoplasma e atua juntamente com a proteína MP (moviment protein) na propagação do DNA viral para células adjacentes. Considerando a importante função de NSP no transporte do vírus na planta, acredita-se que essa proteína interaja com proteínas do hospedeiro nos diversos compartimentos celulares. Neste contexto, a proteína NIG (NSP-interacting GTPase) de Arabidopsis thaliana foi identificada por interagir, in vitro e in vivo, com a proteína NSP de begomovírus. Esta GTPase facilita a liberação do complexo NSP-DNA viral do complexo poro nuclear para o citosol, atuando como provável cofator celular para a função da proteína viral NSP. Apesar da localização citosólica, resultados de microscopia confocal mostraram que tanto o fito-hormônio ácido salicílico (AS) quanto sua proteína parceira, AtWWP1, são capazes de direcionar NIG-GFP para o núcleo das células vegetais. Afim de confirmar o redirecionamento de NIG-GFP para o núcleo após estímulo com ácido salicílico plântulas de A. thaliana superexpressando NIG-GFP foram tratadas com AS, na presença ou ausência de MG132, um inibidor do proteassomo, e, posteriormente, submetidas ao fracionamento nuclear. O acúmulo de NIG-GFP nas frações citosólica e nuclear foi verificado por western blotting. Os resultados reforçaram que o tratamento com o AS é capaz de indicar a proteína NIG-GFP ao núcleo. Para investigar se este transporte núcleo-citoplasmático é dependente de sua parceira AtWWP1, inicialmente, linhagens atwwp1 alelos nulos foram transformadas, pelo método de mergulha floral, com a construção YFP-NIG, obtendo-se linhagens transgênicas atwwp1/YFP-NIG. Posteriormente, a localização subcelular de YFP-NIG foi avaliada nas plantas atwwp1 alelos nulos, na presença ou ausência de tratamento com AS, por microscopia confocal. Os resultados indicam que, mesmo na ausência de AtWWP1, NIG é direcionada para o núcleo na presença de AS. Adicionalmente, há indicativo de que este endereçamento esteja ligado à degradação de NIG por meio do proteassomo. Deste modo, o direcionamento nuclear de NIG em resposta ao estímulo com AS pode representar uma estratégia de defesa da planta contra o vírus, pois, além de sequestrar a proteína NIG no núcleo, de maneira independente à sua parceira AtWWP1, AS promove a degradação de NIG, o que certamente compromete o transporte nucleocitoplasmático do complexo NSP-DNA viral que é facilitado por NIG durante a infecção viral. |
| Palavras-chave | NIG, Begomovírus, WWP1 |
| Forma de apresentação..... | Painel, Oral |